Биохимические методы исследования

В настоящее время установлено, что в основе многих наследственных заболеваний лежит то или иное нарушение обмена веществ. Выделена группа так называемых врожденных ошибок метаболизма (inborn errors of metabolism), обусловленных наследственным дефектом ферментов. Эту группу заболеваний иногда называют энзимопатиями (ферментопатии). В изучении таких форм патологии, установлении характера энзиматического нарушения, а также первичных и вторичных последствий нарушенного обмена веществ основную роль сыграли биохимические методы исследования. Они включают систему качественных и количественных тестов. К ним относятся различные виды электрофореза и хроматографии, применяемые раздельно или в комбинации. Для исследования используют не только биологические жидкости (кровь, моча, цереброспинальная жидкость), но и клетки больного; применяют сложные методы идентификации отдельных ферментов, их активности и структуры. Некоторые из тестов положены в основу массового выявления наследственных заболеваний (например, флюориметрия и тест Гатри, применяющиеся при скринирующих программах на фенилкетонурию). Применение биохимических методов исследования помогает в изучении патогенеза заболевания и разработке эффективных методов терапии. К этим методам исследования близки и методы иммунологического анализа, включающие определение сывороточных иммуноглобулинов разных классов, изучение клеточного иммунитета. К группе таких исследований могут быть отнесены серологические реакции с эритроцитами или лейкоцитами, а также радиоиммунологические методы определения гормонов и некоторых других биологически активных веществ.

Популяционно-географический метод исследования позволяет изучать распространенность редких случаев мутаций в определенных географических регионах в связи со специфическими условиями окружающей среды. Особое значение имеет изучение заболевания в изолированных популяциях с относительно высокой частотой кровнородственных браков.

Цитогенетический метод исследования включает изучение материального носителя наследственной информации: хромосом человека и субстанции половой дифференцировки клеток - полового хроматина. Хромосомный набор, или кариотип, характеризуется определенным числом и строением хромосом. Анализ хромосом осуществляют в различных клетках. Наиболее простой и быстрый метод такого анализа основан на изучении хромосом в лейкоцитах периферической крови человека. Принципиальные приемы анализа хромосом включают добавление в культуру крови колхицина и гипотонических растворов, позволяющих получить препараты хромосом на стадии митоза. Длина хромосом и расположение центромеры позволяют классифицировать хромосомы попарно по группам, обозначаемым латинскими буквами от А до G. Все аутосомы в порядке уменьшения общей длины нумеруются от 1 до 22. Х-хромосома неотличима от аутосом группы С; Y-хромосому, которая по величине относится к группе G, идентифицируют условно.

Важно отметить, что хромосомы различаются окрашиваемостью, что является дополнительным критерием их характеристики при различных патологических состояниях. Мутации хромосом, которые могут быть определены при цитогенетическом исследовании, подразделяются на хромосомные и геномные (см. Хромосомные болезни).

Половым хроматином называют хроматиновое тельце, находящееся в ядрах разных типов клеток и имеющее определенные размеры, форму и положение. Обычно это небольшое тельце треугольной формы, прилегающее основанием к ядерной мембране. Намного проще исследовать половой хроматин в соскобах слизистой оболочки рта, где он обнаруживается у женщин и девочек приблизительно в 20 % клеток. У мужчин и мальчиков в этих соскобах находят лишь до 5 % клеток с половым хроматином. Половой хроматин окрашивается всеми основными ядерными красителями.

Имеется тесное взаимоотношение между количеством и структурой Х-хромосомы и размерами телец полового хроматина. Так, у индивидов, имеющих одну Х-хромосому во всех клетках, половой хроматин практически не выявляется (при синдроме Тернера - ХО, у нормальных мужчин и мальчиков - XY). У индивидов, имеющих две Х-хромосомы, тельца полового хроматина обнаруживаются в 18 - 20 % клеток соскоба слизистой оболочки рта (нормальные женщины и девочки - с набором половых хромосом XX, пациенты с синдромом Клайнфельтера - с набором XXY). Два тельца полового хроматина находят у индивидов с набором половых хромосом XXX, XXXY, XXXYY. Три тельца полового хроматина выявляют у индивидов с набором половых хромосом ХХХХ, XXXXY.

Полоспецифические различия характерны и для ядер полиморфно-ядерных лейкоцитов. Так называемые барабанные палочки этих лейкоцитов имеются у 1 - 6 % нейтрофилов нормальных женщин и девочек и совсем не встречаются у лиц мужского пола.

Таким образом, изучение полового хроматина и "барабанных палочек" сигнализирует о возможных нарушениях полового развития.

Б. Лeбeдeв и др.

Вся информация в разделе: Неврология, заболевания нервной системы